基于鸡胚绒毛膜尿囊膜的化妆品眼刺激安全性评价
眼刺激
眼刺激，在《化妆品安全技术规范》中的释义是，眼球表面，包括角膜、巩膜以及结膜部分，接触受试物后所产生的可逆性炎性变化。急性眼刺激试验是用以确定和评价化妆品原料及其产品对哺乳动物的眼睛是否有刺激作用及其程度。
长期以来，皮肤、眼睛刺激性试验主要依赖动物试验。家兔的眼刺激试验（Draize 试验）自20 世纪 40 年代起作为评价化妆品及其原料眼刺激的主要方法，是很多国家管理机构的毒理学安全性评价常规测试方法之一。但很多研究显示此方法存在评分系统主观、实验室间变异性以及动物外推至人的种属差异等缺点。
近年来随着“3Rs”原则（Reduction，减少试验中使用的动物数量；Refinement，缓解或减轻动物的疼痛和痛苦；Replacement，替代整体动物试验）的兴起，动物福利日趋受到重视，家兔的眼刺激性试验在伦理上与科学上均受到质疑；近年来，以欧盟为首的全球众多国家和地区纷纷呼吁禁止在化妆品安全评价中使用动物试验，积极推动家兔眼刺激性试验的替代方法研究的发展。
基于鸡胚绒毛膜尿囊膜的试验
这类试验是利用鸡胚绒毛膜尿囊膜（chicken chorioallantoic menbrane，CAM）与人结膜相似的特点开发的替代试验，以CAM为替代材料研究化妆品的眼刺激性。
01
鸡胚绒毛膜尿囊膜试验(HET-CAM)
试验方法
以0.3 ml受试物直接加至第10天鸡胚气室底部的CAM，观察出血、血管溶解和凝血(大中血管内血栓形成或鸡胚蛋白混浊)等终点，计算刺激评分(irritation score. IS）
评价标准
预测模型可采用反应时间法(即测定每一种反应终点出现的时间)或刺激阈值法(即测定导致上述毒性终点发生的受试物浓度)。
HET-CAM主要适用于无刺激到轻度刺激物的预测或筛选，对中度以上的刺激物应补充其它实验确认。适合HET-CAM检测的化合物包括多种类型液体原料和产品，特别适用于表面活性剂和表面活性剂配方，对固体、不溶性或粘稠物质的测试重复性较差，色素和染料测试应慎重。
02
绒毛膜尿囊膜血管试验 (CAMVA）
试验方法
在4日龄受精鸡胚上开口，抽取去除约3 mL蛋清，人为造成CAM。第10天时，将不同浓度稀释的受试物直接暴露于CAM中的“O”形特富龙环，孵育30 min后观察CAM血管变化，包括出血、充血、鬼影血管等，将使50%的受精鸡胚出现反应的受试物浓度（RC50）作为检测终点。
评价标准
计算使50%的鸡胚出现上述损伤的受试物浓度。RC50>3%，无刺激性；RC50≤3%，有刺激性。
CAMVA法适用于轻度到中度眼刺激性化合物的检测，也可正确区分刺激物和非刺激物，但不能用于严重刺激性物质的分类。适于检测物质的类型同HET-CAM法。
注:①表面活性剂;②除表面活性剂以外的其它可溶性化合物;③固体和粘性难溶化合物
用CAM方法评估特定种类化学品眼刺激性的试验都显示了较满意结果。如Budai等用HET-CAM对6种杀虫剂的眼刺激性评估结果与Draize试验结果有很好相关性，仅在刺激分级上有所不同。
基于鸡胚绒毛膜尿囊膜的试验如HET-CAM，CAMVA已获得欧盟许可，并且一些欧盟国家已将其用于化妆品安全性评价。上海日用化妆品行业协会也出具了相应的团体标准T/SHRH 011-2018 《化妆品眼刺激性/腐蚀性的鸡胚绒毛尿囊膜试验》，上述试验方法将会在化妆品原料及其产品的安全性评价和浓度筛选中发挥作用，助力化妆品行业的蓬勃发展。
参考文献
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[2]敖华英,程树军,潘芳等.化妆品眼刺激试验替代方法标准化与展望[J].中国比较医学杂志,2012,22(01):74-78.
[3]王宁,洪新宇,帅怡,孙宇立,杨隽,肖萍.鸡胚绒毛尿囊膜血管试验在化妆品安全性评价中的应用研究[J].现代预防医学,2016,43(22):4163-4165+4199.
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